Validigo de metodo por detekti melaminon en bebmanĝaĵo kaj laktopulvoro vendataj en Irano

Dankon pro via vizito al nature.com. La retumilversio, kiun vi uzas, havas limigitan subtenon por CSS. Por la plej bona sperto, ni rekomendas uzi la plej novan retumilversion (aŭ malŝalti kongruecan reĝimon en Internet Explorer). Plie, por certigi daŭran subtenon, ĉi tiu retejo ne inkluzivos stilojn aŭ JavaScript.
Melamino estas agnoskita manĝaĵa poluaĵo, kiu povas ĉeesti en certaj manĝaĵkategorioj kaj hazarde kaj intence. La celo de ĉi tiu studo estis kontroli la detekton kaj kvantigon de melamino en bebformulo kaj laktopulvoro. Entute 40 komerce haveblaj manĝaĵaj specimenoj, inkluzive de bebformulo kaj laktopulvoro, el malsamaj regionoj de Irano estis analizitaj. La proksimuma melamina enhavo de la specimenoj estis determinita uzante alt-efikecan likvan kromatografion-ultraviola (HPLC-UV) sistemon. Kalibrada kurbo (R2 = 0.9925) estis konstruita por la detekto de melamino en la intervalo de 0.1–1.2 μg mL−1. La limoj de kvantigo kaj detekto estis 1 μg mL−1 kaj 3 μg mL−1, respektive. Melamino estis testita en bebformulo kaj laktopulvoro, kaj la rezultoj montris, ke la melaminaj niveloj en la bebformulo kaj laktopulvoraj specimenoj estis 0.001–0.095 mg kg−1 kaj 0.001–0.004 mg kg−1, respektive. Ĉi tiuj valoroj konformas al la EU-leĝaro kaj la Codex Alimentarius. Gravas noti, ke la konsumado de ĉi tiuj laktaĵoj kun reduktita melamina enhavo ne prezentas signifan riskon por la sano de konsumantoj. Ĉi tion ankaŭ subtenas la rezultoj de la riskotakso.
Melamino estas organika kombinaĵo kun la molekula formulo C3H6N6, derivita de cianamido. Ĝi havas tre malaltan solveblecon en akvo kaj enhavas proksimume 66% da nitrogeno. Melamino estas vaste uzata industria kombinaĵo kun vasta gamo da legitimaj uzoj en la produktado de plastoj, sterkoj kaj nutraĵprilaboraj ekipaĵoj (inkluzive de nutraĵpakaĵoj kaj kuirejaj iloj)1,2. Melamino ankaŭ estas uzata kiel medikamento-portanto por la traktado de malsanoj. La alta proporcio de nitrogeno en melamino povas konduki al misuzo de la kombinaĵo kaj al la transdono de la ecoj de proteinmolekuloj al nutraĵingrediencoj3,4. Tial, aldoni melaminon al nutraĵoj, inkluzive de laktaĵoj, pliigas la nitrogenan enhavon. Tiel, oni erare konkludis, ke la proteina enhavo de lakto estis pli alta ol ĝi efektive estis.
Por ĉiu gramo da aldonita melamino, la proteina enhavo de manĝaĵoj pliiĝos je 0.4%. Tamen, melamino estas tre solvebla en akvo kaj povas kaŭzi pli gravajn damaĝojn. Aldoni 1.3 gramojn da melamino al likvaj produktoj kiel lakto povas pliigi la proteinan enhavon de la lakto je 30%5,6. Kvankam melamino estas aldonita al bestaj kaj eĉ homaj manĝaĵoj por pliigi la proteinan enhavon7, la Komisiono pri Codex Alimentarius (CAC) kaj naciaj aŭtoritatoj ne aprobis melaminon kiel manĝaldonaĵon kaj listigis ĝin kiel danĝeran se englutite, enspirite aŭ absorbite tra la haŭto. En 2012, la Internacia Agentejo por Esploro pri Kancero de la Monda Organizaĵo pri Sano (MOS) listigis melaminon kiel kancerogenaĵon de Klaso 2B ĉar ĝi povas esti damaĝa al homa sano8. Longtempa eksponiĝo al melamino povas kaŭzi kanceron aŭ renan difekton2. Melamino en manĝaĵoj povas kompleksiĝi kun cianurata acido por formi akvonesolveblajn flavajn kristalojn, kiuj povas kaŭzi damaĝon al reno kaj vezika histo, same kiel urinduktan kanceron kaj malpeziĝon9,10. Ĝi povas kaŭzi akutan nutraĵan veneniĝon kaj, en altaj koncentriĝoj, morton, precipe ĉe beboj kaj junaj infanoj.11 La Monda Organizaĵo pri Sano (MOS) ankaŭ fiksis la tolereblan ĉiutagan konsumon (TDI) de melamino por homoj je 0.2 mg/kg korpopezo tage, bazite sur CAC-gvidlinioj.12 La Usona Administracio pri Nutraĵoj kaj Medikamentoj (US FDA) fiksis la maksimuman restaĵnivelon por melamino je 1 mg/kg en beblakto kaj 2.5 mg/kg en aliaj nutraĵoj.2,7 En septembro 2008, oni raportis, ke pluraj hejmaj fabrikantoj de beblakto aldonis melaminon al laktopulvoro por pliigi la proteinan enhavon de siaj produktoj, rezultante en laktopulvora veneniĝo kaj ekigante tutlandan melaminan veneniĝan okazaĵon, kiu malsanigis pli ol 294,000 infanojn kaj hospitaligis pli ol 50,000.13
Mamnutrado ne ĉiam eblas pro diversaj faktoroj kiel la malfacilaĵoj de urba vivo, malsanoj de la patrino aŭ infano, kio kondukas al la uzo de beba lakto por nutri bebojn. Rezulte, fabrikoj estis establitaj por produkti beban laktoformulon, kiu estas kiel eble plej simila al patrina lakto laŭ konsisto14. Beba laktoformulo vendata en la merkato kutime estas farita el bovina lakto kaj kutime estas farita kun speciala miksaĵo de grasoj, proteinoj, karbonhidratoj, vitaminoj, mineraloj kaj aliaj komponaĵoj. Por esti simila al patrina lakto, la proteina kaj grasa enhavo de la laktoformulo varias, kaj depende de la tipo de lakto, ĝi estas fortikigita per komponaĵoj kiel vitaminoj kaj mineraloj kiel fero15. Ĉar beboj estas sentema grupo kaj ekzistas risko de veneniĝo, la sekureco de laktopulvora konsumo estas de esenca graveco por la sano. Post la kazo de melamina veneniĝo inter ĉinaj beboj, landoj tra la mondo atentis ĉi tiun aferon, kaj la sentemo de ĉi tiu areo ankaŭ pliiĝis. Tial, estas aparte grave plifortigi la kontrolon de beba laktoformula produktado por protekti la sanon de beboj. Ekzistas diversaj metodoj por detekti melaminon en nutraĵoj, inkluzive de alt-efikeca likva kromatografio (HPLC), elektroforezo, sensa metodo, spektrofotometrio kaj antigeno-antikorpa enzim-ligita imunosorba analizo16. En 2007, la Usona Administracio pri Nutraĵoj kaj Medikamentoj (FDA) evoluigis kaj publikigis HPLC-metodon por la determinado de melamino kaj cejanurata acido en nutraĵoj, kiu estas la plej efika metodo por determini la enhavon de melamino17.
Melamino-koncentriĝoj en beb-lakto, mezuritaj per nova infraruĝa spektroskopia tekniko, variis de 0,33 ĝis 0,96 miligramoj por kilogramo (mg kg-1). 18 Studo en Srilanko trovis, ke melamino-niveloj en plenlaktopulvoro varias de 0,39 ĝis 0,84 mg kg-1. Krome, importitaj beb-laktospecimenoj enhavis la plej altajn nivelojn de melamino, je 0,96 kaj 0,94 mg/kg, respektive. Ĉi tiuj niveloj estas sub la reguliga limo (1 mg/kg), sed monitorada programo estas necesa por la sekureco de konsumantoj. 19
Pluraj studoj ekzamenis la nivelojn de melamino en iranaj bebformuloj. Ĉirkaŭ 65% de la specimenoj enhavis melaminon, kun averaĝo de 0,73 mg/kg kaj maksimumo de 3,63 mg/kg. Alia studo raportis, ke la nivelo de melamino en bebformulo variis de 0,35 ĝis 3,40 μg/kg, kun averaĝo de 1,38 μg/kg. Ĝenerale, la ĉeesto kaj nivelo de melamino en iranaj bebformuloj estis taksitaj en diversaj studoj, kun kelkaj specimenoj enhavantaj melaminon superantan la maksimuman limon fiksitan de reguligaj aŭtoritatoj (2,5 mg/kg/furaĝo).
Konsiderante la grandegan rektan kaj nerektan konsumon de laktopulvoro en la nutraĵindustrio kaj la specialan gravecon de bebformulo en la nutrado de infanoj, ĉi tiu studo celis validigi la detektometodon de melamino en laktopulvoro kaj bebformulo. Fakte, la unua celo de ĉi tiu studo estis evoluigi rapidan, simplan kaj precizan kvantan metodon por detekti melaminan fuŝaĵon en bebformulo kaj laktopulvoro uzante alt-efikecan likvan kromatografion (HPLC) kaj ultraviolan (UV) detekton; Due, la celo de ĉi tiu studo estis determini la melaminan enhavon en bebformulo kaj laktopulvoro vendataj en la irana merkato.
La instrumentoj uzataj por melamina analizo varias depende de la loko de nutraĵproduktado. Sentema kaj fidinda HPLC-UV-analiza metodo estis uzata por mezuri melaminajn restaĵojn en lakto kaj beb-formulo. Laktaĵoj enhavas diversajn proteinojn kaj grasojn, kiuj povas malhelpi melaminan mezuradon. Tial, kiel notis Sun et al. 22, taŭga kaj efika puriga strategio estas necesa antaŭ instrumenta analizo. En ĉi tiu studo, ni uzis unu-uzajn injektilajn filtrilojn. En ĉi tiu studo, ni uzis C18-kolumnon por apartigi melaminon en beb-formulo kaj laktopulvoro. Figuro 1 montras la kromatogramon por melamina detekto. Krome, la reakiro de la specimenoj enhavantaj 0,1–1,2 mg/kg da melamino variis de 95% ĝis 109%, la regresa ekvacio estis y = 1,2487x − 0,005 (r = 0,9925), kaj la relativaj normaj devio-valoroj (RSD) variis de 0,8 ĝis 2%. La haveblaj datumoj indikas, ke la metodo estas fidinda en la studita koncentriĝa intervalo (Tabelo 1). La instrumenta detektolimo (LOD) kaj kvantiglimo (LOQ) de melamino estis 1 μg mL−1 kaj 3 μg mL−1, respektive. Krome, la UV-spektro de melamino montris absorban bendon je 242 nm. La detektometodo estas sentema, fidinda kaj preciza. Ĉi tiu metodo povas esti uzata por rutina determinado de melamina nivelo.
Similaj rezultoj estis publikigitaj de pluraj aŭtoroj. Alt-efikeca likva kromatografio-fotodioda aro (HPLC) metodo estis evoluigita por la analizo de melamino en laktaĵoj. La pli malaltaj limoj de kvantigo estis 340 μg kg−1 por laktopulvoro kaj 280 μg kg−1 por bebformulo je 240 nm. Filazzi et al. (2012) raportis, ke melamino ne estis detektita en bebformulo per HPLC. Tamen, 8% de la laktopulvoraj specimenoj enhavis melaminon je nivelo de 0,505–0,86 mg/kg. Tittlemiet et al.23 faris similan studon kaj determinis la melaminan enhavon de bebformulo (specimena numero: 72) per alt-efikeca likva kromatografio-masa spektrometrio/MS (HPLC-MS/MS) kiel proksimume 0,0431–0,346 mg kg−1. En studo farita de Venkatasamy et al. (2010), verda kemia aliro (sen acetonitrilo) kaj inversfaza alt-efikeca likva kromatografio (RP-HPLC) estis uzitaj por taksi melaminon en bebformulo kaj lakto. La provaĵa koncentriĝintervalo estis de 1,0 ĝis 80 g/mL kaj la respondo estis lineara (r > 0,999). La metodo montris reakirojn de 97,2–101,2 super la koncentriĝintervalo de 5–40 g/mL kaj la reproduktebleco estis malpli ol 1,0% relativa norma devio. Krome, la observitaj LOD kaj LOQ estis 0,1 g mL−1 kaj 0,2 g mL−124, respektive. Lutter et al. (2011) determinis melaminan poluadon en bovina lakto kaj laktobazita bebformulo uzante HPLC-UV. Melamino-koncentriĝoj variis de < 0,2 ĝis 2,52 mg kg−1. La lineara dinamika gamo de la HPLC-UV-metodo estis 0,05 ĝis 2,5 mg kg−1 por bovina lakto, 0,13 ĝis 6,25 mg kg−1 por bebformulo kun proteina masa frakcio de <15%, kaj 0,25 ĝis 12,5 mg kg−1 por bebformulo kun proteina masa frakcio de 15%. La rezultoj de LOD (kaj LOQ) estis 0,03 mg kg−1 (0,09 mg kg−1) por bovina lakto, 0,06 mg kg−1 (0,18 mg kg−1) por bebformulo kun <15% proteino, kaj 0,12 mg kg−1 (0,36 mg kg−1) por bebformulo kun 15% proteino, kun signalo-bruo-proporcio de 3 kaj 1025 por LOD kaj LOQ, respektive. Diebes et al. (2012) esploris melaminajn nivelojn en bebformuloj kaj laktopulvoraj specimenoj uzante HPLC/DMD. En beblakto, la plej malalta kaj plej alta niveloj estis 9,49 mg kg−1 kaj 258 mg kg−1, respektive. La limo de detekto (LOD) estis 0,05 mg kg−1.
Javaid kaj aliaj raportis, ke melaminaj restaĵoj en beba laktoformulo estis en la intervalo de 0,002–2 mg kg−1 per Fourier-transforma infraruĝa spektroskopio (FT-MIR) (LOD = 1 mg kg−1; LOQ = 3,5 mg kg−1). Rezai kaj aliaj27 proponis HPLC-DDA (λ = 220 nm) metodon por taksi melaminon kaj atingis LOQ de 0,08 μg mL−1 por laktopulvoro, kio estis pli malalta ol la nivelo akirita en ĉi tiu studo. Sun kaj aliaj evoluigis RP-HPLC-DAD por la detekto de melamino en likva lakto per solidfaza ekstraktado (SPE). Ili akiris LOD kaj LOQ de 18 kaj 60 μg kg−128, respektive, kio estas pli sentema ol la nuna studo. Montesano kaj aliaj konfirmis la efikecon de la HPLC-DMD-metodo por la takso de melamina enhavo en proteinaj suplementoj kun kvantiglimo de 0,05–3 mg/kg, kiu estis malpli sentema ol la metodo uzita en ĉi tiu studo29.
Sendube, analizaj laboratorioj ludas gravan rolon en la protektado de la medio per monitorado de poluaĵoj en diversaj specimenoj. Tamen, la uzo de granda nombro da reakciiloj kaj solviloj dum analizo povas rezultigi la formadon de danĝeraj restaĵoj. Tial, verda analiza kemio (GAC) estis evoluigita en 2000 por redukti aŭ elimini la malutilajn efikojn de analizaj proceduroj sur funkciigistojn kaj la medion26. Tradiciaj melaminaj detektometodoj, inkluzive de kromatografio, elektroforezo, kapilara elektroforezo kaj enzim-ligita imunosorba analizo (ELISA), estis uzitaj por identigi melaminon. Tamen, inter la multaj detektometodoj, elektrokemiaj sensiloj altiris multan atenton pro sia bonega sentemeco, selektiveco, rapida analiztempo kaj uzanto-amikaj karakterizaĵoj30,31. Verda nanoteknologio utiligas biologiajn vojojn por sintezi nanomaterialojn, kiuj povas redukti la generadon de danĝeraj ruboj kaj energikonsumon, tiel antaŭenigante la efektivigon de daŭripovaj praktikoj. Nanokompozitoj, ekzemple, faritaj el ekologie amikaj materialoj, povas esti uzataj en biosensiloj por detekti substancojn kiel melamino32,33,34.
La studo montras, ke solidfaza mikroekstraktado (SPME) estas uzata efike pro sia pli alta energiefikeco kaj daŭripovo kompare kun tradiciaj ekstraktaj metodoj. La media amikeco kaj energiefikeco de SPME igas ĝin bonega alternativo al tradiciaj ekstraktaj metodoj en analiza kemio kaj provizas pli daŭripovan kaj efikan metodon por specimenpreparado35.
En 2013, Wu kaj aliaj evoluigis tre senteman kaj selekteman surfacan plasmonan resonancan (mini-SPR) biosensilon, kiu utiligas la kupladon inter melamino kaj kontraŭmelaminaj antikorpoj por rapide detekti melaminon en beba laktaĵo per imunanalizo. La SPR-biosensilo kombinita kun imunanalizo (uzante melamino-konjugitan bovan serumalbuminon) estas facile uzebla kaj malaltkosta teknologio kun detektolimo de nur 0.02 μg mL-136.
Nasiri kaj Abbasian uzis alt-potencialan porteblan sensilon kombine kun grafena oksido-kitosana kompozitoj (GOCS) por detekti melaminon en komercaj specimenoj37. Ĉi tiu metodo montris ultra-altan selektivecon, precizecon kaj respondon. La GOCS-sensilo montris rimarkindan sentemon (239.1 μM−1), linearan gamon de 0.01 ĝis 200 μM, afinecan konstanton de 1.73 × 104, kaj LOD ĝis 10 nM. Krome, studo farita de Chandrasekhar et al. en 2024 adoptis ekologieman kaj kostefikan aliron. Ili uzis papajoŝelan ekstrakton kiel reduktantan agenton por sintezi zinkoksidajn nanopartiklojn (ZnO-NP-oj) per ekologiema metodo. Poste, unika mikro-Raman-spektroskopia tekniko estis evoluigita por la determinado de melamino en beba formulo. ZnO-NP-oj derivitaj de agrikulturaj ruboj montris potencialon kiel valora diagnoza ilo kaj fidinda, malaltkosta teknologio por monitori kaj detekti melaminon38.
Alizadeh kaj aliaj (2024) uzis tre senteman metal-organikan kadran (MOF) fluoreskan platformon por determini melaminon en laktopulvoro. La lineara intervalo kaj la pli malalta detektolimo de la sensilo, determinitaj uzante 3σ/S, estis 40 ĝis 396.45 nM (ekvivalenta al 25 μg kg−1 ĝis 0.25 mg kg−1) kaj 40 nM (ekvivalenta al 25 μg kg−1), respektive. Ĉi tiu intervalo estas multe sub la maksimumaj restaĵniveloj (MRL-oj) fiksitaj por la identigo de melaminon en bebmanĝaĵo (1 mg kg−1) kaj aliaj nutraĵaj/furaĝaj specimenoj (2.5 mg kg−1). Fluoreska sensilo (terbio (Tb)@NH2-MIL-253(Al)MOF) montris pli altan precizecon kaj pli precizan mezurkapablon ol HPLC39 en detektado de melaminon en laktopulvoro. Biosensiloj kaj nanokompozitoj en verda kemio ne nur plibonigas detektokapablojn, sed ankaŭ minimumigas mediajn danĝerojn konforme al principoj de daŭripova disvolviĝo.
Principoj de verda kemio estis aplikitaj al diversaj metodoj por la determinado de melamino. Unu aliro estas la disvolviĝo de verda dispersa solid-faza mikroekstrakta metodo uzante la naturan polusan polimeron β-ciklodekstrino krucligitan kun citrata acido por la efika ekstraktado de melamino 40 el specimenoj kiel beblakto kaj varma akvo. Alia metodo uzas la Mannich-reakcion por la determinado de melamino en laktospecimenoj. Ĉi tiu metodo estas malmultekosta, ekologie amika kaj tre preciza kun lineara intervalo de 0,1–2,5 ppm kaj malalta detektolimo 41. Krome, kostefika kaj ekologie amika metodo por la kvanta determinado de melamino en likva lakto kaj beblakto estis disvolvita uzante Fourier-transforman infraruĝan transmisian spektroskopion kun alta precizeco kaj detektolimoj de 1 ppm kaj 3,5 ppm, respektive 42. Ĉi tiuj metodoj montras la aplikon de principoj de verda kemio al la disvolviĝo de efikaj kaj daŭrigeblaj metodoj por la determinado de melamino.
Pluraj studoj proponis novigajn metodojn por detekto de melamino, kiel ekzemple la uzon de solid-faza ekstraktado kaj alt-efikeca likva kromatografio (HPLC)43, same kiel rapidan alt-efikecan likvan kromatografion (HPLC), kiu ne postulas kompleksan antaŭtraktadon aŭ jon-parajn reakciilojn, tiel reduktante la kvanton de kemia rubo44. Ĉi tiuj metodoj ne nur provizas precizajn rezultojn por la determinado de melamino en laktaĵoj, sed ankaŭ konformas al la principoj de verda kemio, minimumigante la uzon de danĝeraj kemiaĵoj kaj reduktante la ĝeneralan median efikon de la analiza procezo.
Kvardek specimenoj de malsamaj markoj estis testitaj trioble, kaj la rezultoj estas prezentitaj en Tabelo 2. La niveloj de melamino en la specimenoj de bebformulo kaj laktopulvoro variis de 0,001 ĝis 0,004 mg/kg kaj de 0,001 ĝis 0,095 mg/kg, respektive. Neniuj signifaj ŝanĝoj estis observitaj inter la tri aĝogrupoj de bebformulo. Krome, melamino estis detektita en 80% de laktopulvoro, sed 65% de bebformuloj estis poluitaj per melamino.
La melamina enhavo en industria laktopulvoro estis pli alta ol en beba formulo, kaj la diferenco estis signifa (p<0,05) (Figuro 2).
La rezultoj akiritaj estis sub la limoj fiksitaj de la FDA (sub 1 kaj 2,5 mg/kg). Krome, la rezultoj konformas al la limoj fiksitaj de CAC (2010) kaj EU45,46, t.e. la maksimuma permesita limo estas 1 mg kg-1 por bebmanĝaĵo kaj 2,5 mg kg-1 por laktaĵoj.
Laŭ studo de 2023 farita de Ghanati et al.47, la melamina enhavo en malsamaj specoj de pakita lakto en Irano variis de 50,7 ĝis 790 μg kg−1. Iliaj rezultoj estis sub la permesita limo de la FDA. Niaj rezultoj estas pli malaltaj ol tiuj de Shoder et al.48 kaj Rima et al.49. Shoder et al. (2010) trovis, ke melaminaj niveloj en laktopulvoro (n=49) determinitaj per ELISA variis de 0,5 ĝis 5,5 mg/kg. Rima et al. analizis melaminajn restaĵojn en laktopulvoro per fluoreska spektrofotometrio kaj trovis, ke la melamina enhavo en laktopulvoro estis 0,72–5,76 mg/kg. Studo estis farita en Kanado en 2011 por monitori melaminajn nivelojn en bebmanĝaĵo (n=94) uzante likvan kromatografion (LC/MS). Melaminaj koncentriĝoj estis trovitaj sub la akceptebla limo (prepara normo: 0,5 mg kg−1). Estas neverŝajne, ke la detektitaj fraŭdaj melaminniveloj estis taktiko uzata por pliigi la proteinan enhavon. Tamen, ĝi ne povas esti klarigita per la uzo de sterkoj, translokigo de ujenhavo aŭ similaj faktoroj. Krome, la fonto de melamino en laktopulvoro importita en Kanadon ne estis malkaŝita50.
Hassani kaj aliaj mezuris la melaminan enhavon en laktopulvoro kaj likva lakto en la irana merkato en 2013 kaj trovis similajn rezultojn. La rezultoj montris, ke krom unu marko de laktopulvoro kaj likva lakto, ĉiuj aliaj specimenoj estis poluitaj per melamino, kun niveloj variantaj de 1,50 ĝis 30,32 μg g−1 en laktopulvoro kaj 0,11 ĝis 1,48 μg ml−1 en lakto. Rimarkinde, cejanurata acido ne estis detektita en iu ajn el la specimenoj, reduktante la eblecon de melamina veneniĝo por konsumantoj. 51 Antaŭaj studoj taksis la melaminan koncentriĝon en ĉokoladaj produktoj enhavantaj laktopulvoron. Ĉirkaŭ 94% de importitaj specimenoj kaj 77% de iranaj specimenoj enhavis melaminon. Melamino-niveloj en importitaj specimenoj variis de 0,032 ĝis 2,692 mg/kg, dum tiuj en iranaj specimenoj variis de 0,013 ĝis 2,600 mg/kg. Entute, melamino estis detektita en 85% de la specimenoj, sed nur unu specifa marko havis nivelojn super la permesita limo.44 Tittlemier et al. raportis melaminnivelojn en laktopulvoro intervalantajn de 0,00528 ĝis 0,0122 mg/kg.
Tabelo 3 resumas la rezultojn de riskotaksado por la tri aĝogrupoj. La risko estis malpli ol 1 en ĉiuj aĝogrupoj. Tial, ne ekzistas nekancera sanrisko pro melamino en beblakto.
Pli malaltaj niveloj de poluado en laktaĵoj povas ŝuldiĝi al neintencita poluado dum preparado, dum pli altaj niveloj povas ŝuldiĝi al intencaj aldonoj. Krome, la ĝenerala risko por homa sano pro konsumado de laktaĵoj kun malaltaj melaminaj niveloj estas konsiderata malalta. Oni povas konkludi, ke konsumado de produktoj enhavantaj tiajn malaltajn nivelojn de melamino ne prezentas riskon por la sano de konsumantoj52.
Konsiderante la gravecon de nutraĵsekureca administrado en la laktoindustrio, precipe rilate al protektado de publika sano, estas plej grave disvolvi kaj validigi metodon por taksi kaj kompari melaminajn nivelojn kaj restaĵojn en laktopulvoro kaj bebformulo. Simpla kaj preciza HPLC-UV-spektrofotometria metodo estis disvolvita por la determinado de melamino en bebformulo kaj laktopulvoro. La metodo estis validigita por certigi ĝian fidindecon kaj precizecon. La detekto- kaj kvantigo-limoj de la metodo montriĝis sufiĉe sentemaj por mezuri melaminajn nivelojn en bebformulo kaj laktopulvoro. Laŭ niaj datumoj, melamino estis detektita en la plej multaj el la iranaj specimenoj. Ĉiuj detektitaj melaminaj niveloj estis sub la maksimumaj permesitaj limoj fiksitaj de CAC, indikante, ke konsumado de ĉi tiuj specoj de laktaĵoj ne prezentas riskon por homa sano.
Ĉiuj uzitaj kemiaj reakciaĵoj estis de analiza grado: melamino (2,4,6-triamino-1,3,5-triazino) 99% pura (Sigma-Aldrich, St. Louis, MO); HPLC-grada acetonitrilo (Merck, Darmstadt, Germanio); ultrapura akvo (Millipore, Morfheim, Francio). Unuuzaj injektilfiltriloj (Chromafil Xtra PVDF-45/25, porgrandeco 0,45 μm, membranodiametro 25 mm) (Macherey-Nagel, Düren, Germanio).
Ultrasona bano (Elma, Germanio), centrifugilo (Beckman Coulter, Krefeld, Germanio) kaj HPLC (KNAUER, Germanio) estis uzitaj por prepari la specimenojn.
Alt-efikeca likva kromatografo (KNAUER, Germanio) ekipita per UV-detektilo estis uzata. La HPLC-analizaj kondiĉoj estis jenaj: UHPLC Ultimate-sistemo ekipita per ODS-3 C18 analiza kolono (4,6 mm × 250 mm, partikla grandeco 5 μm) (MZ, Germanio) estis uzata. La HPLC-eluanto (movebla fazo) estis TFA/metanola miksaĵo (450:50 mL) kun flukvanto de 1 mL min-1. La detekta ondolongo estis 242 nm. La injekta volumeno estis 100 μL, la kolona temperaturo estis 20 °C. Ĉar la retentempo de la medikamento estas longa (15 minutoj), la sekva injekto devus esti farita post 25 minutoj. Melamino estis identigita komparante la retentempon kaj la UV-spektran pinton de melaminaj normoj.
Norma solvaĵo de melamino (10 μg/mL) estis preparita uzante akvon kaj konservita en fridujo (4 °C) for de lumo. Diluu la bazan solvaĵon kun la movebla fazo kaj preparu labornormajn solvaĵojn. Ĉiu norma solvaĵo estis injektita en la HPLC-on 7 fojojn. La kalibra ekvacio 10 estis kalkulita per regresa analizo de la determinita pintareo kaj la determinita koncentriĝo.
Komerce havebla bovina laktopulvoro (20 specimenoj) kaj specimenoj de malsamaj markoj de bovina lakto-bazita bebformulo (20 specimenoj) estis aĉetitaj de lokaj superbazaroj kaj apotekoj en Irano por nutri bebojn de malsamaj aĝogrupoj (0–6 monatoj, 6–12 monatoj, kaj >12 monatoj) kaj konservitaj je friduja temperaturo (4 °C) ĝis analizo. Poste, 1 ± 0.01 g da homogenigita laktopulvoro estis pesita kaj miksita kun acetonitrilo:akvo (50:50, v/v; 5 mL). La miksaĵo estis kirlota dum 1 minuto, poste sonikita en ultrasona bano dum 30 minutoj, kaj fine skuita dum 1 minuto. La miksaĵo estis poste centrifugita je 9000 × g dum 10 minutoj je ĉambra temperaturo kaj la supernatanto estis filtrita en 2 ml aŭtomata specimenila fioleto uzante 0.45 μm injektilfiltrilon. La filtraĵo (250 μl) estis poste miksita kun akvo (750 μl) kaj injektita sur la HPLC-sistemon10,42.
Por validigi la metodon, ni determinis la reakiron, precizecon, limon de detekto (LOD), limon de kvantifiko (LOQ), kaj precizecon sub optimumaj kondiĉoj. La LOD estis difinita kiel la specimenenhavo kun pinta alteco triobla la baza bruonivelo. Aliflanke, la specimenenhavo kun pinta alteco 10-obla la signalo-bruo-rilatumo estis difinita kiel la LOQ.
La respondo de la aparato estis determinita uzante kalibran kurbon konsistantan el sep datenpunktoj. Malsamaj melaminaj enhavoj estis uzitaj (0, 0.2, 0.3, 0.5, 0.8, 1 kaj 1.2). La lineareco de la melamina kalkulproceduro estis determinita. Krome, pluraj malsamaj niveloj de melamino estis aldonitaj al la blankaj specimenoj. La kalibra kurbo estis konstruita per kontinua injektado de 0.1–1.2 μg mL−1 da norma melamina solvaĵo en beblanĉaĵon kaj pulvorlaktprovaĵojn, kaj ĝia R2 = 0.9925. La precizeco estis taksita per ripeteblo kaj reproduktebleco de la proceduro kaj estis atingita per injektado de specimenoj en la unua kaj tri postaj tagoj (trioble). La ripeteblo de la metodo estis taksita per kalkulado de la RSD-% por tri malsamaj koncentriĝoj de aldonita melamino. Reakiraj studoj estis faritaj por determini la precizecon. La grado de reakiro per la ekstrakta metodo estis kalkulita je tri niveloj de melamina koncentriĝo (0.1, 1.2, 2) en specimenoj de beblakto kaj seka lakto9,11,15.
La taksita ĉiutaga konsumado (EDI) estis determinita uzante la jenan formulon: EDI = Ci × Cc/BW.
Kie Ci estas la averaĝa melamina enhavo, Cc estas la laktokonsumo kaj BW estas la averaĝa pezo de infanoj.
Datumanalizo estis farita per SPSS 24. Normaleco estis testita per la Kolmogorov-Smirnov-testo; ĉiuj datumoj estis neparametraj testoj (p = 0). Tial, la Kruskal-Wallis-testo kaj la Mann-Whitney-testo estis uzitaj por determini signifajn diferencojn inter la grupoj.
Ingelfinger, Jr. Melamino kaj ĝia efiko sur tutmonda manĝaĵpoluado. New England Journal of Medicine 359(26), 2745–2748 (2008).
Lynch, RA, et al. Efiko de pH sur melamina migrado en infanaj bovloj. Internacia Revuo pri Manĝaĵa Poluado, 2, 1–8 (2015).
Barrett, MP kaj Gilbert, IH Celado de toksaj kombinaĵoj al la interno de tripanosomoj. Progress in Parasitology 63, 125–183 (2006).
Nirman, MF, et al. En vitro kaj en vivo taksado de melaminaj dendrimeroj kiel medikamentenhavigiloj. Internacia Revuo pri Farmacio, 281(1–2), 129–132(2004).
Monda Organizaĵo pri Sano. Ekspertaj Kunvenoj 1–4 por revizii la toksikologiajn aspektojn de melamino kaj cejanurata acido (2008).
Howe, AK-C., Kwan, TH kaj Lee, PK-T. Tokseco de melamino kaj la reno. Journal of the American Society of Nephrology 20(2), 245–250 (2009).
Ozturk, S. kaj Demir, N. Evoluigo de nova IMAC-adsorbanto por la identigo de melamino en laktaĵoj per alt-efikeca likva kromatografio (HPLC). Journal of Food Synthesis and Analysis 100, 103931 (2021).
Chansuvarn, V., Panic, S. kaj Imim, A. Simpla spektrofotometria determinado de melamino en likva lakto bazita sur la verda reakcio de Mannich. Spectrochem. Acta Part A Mol. Biomol. Spectrosc. 113, 154–158 (2013).
Deabes, M. kaj El-Habib, R. Determino de melamino en bebmanĝaĵo, laktopulvoro kaj pangasius-specimenoj per HPLC/dioda aro-kromatografio. Journal of Environmental Analytical Toxicology, 2(137), 2161–0525.1000137 (2012).
Skinner, KG, Thomas, JD, kaj Osterloh, JD. Toksikeco de melamino. Journal of Medical Toxicology, 6, 50–55 (2010).
Monda Organizaĵo pri Sano (MOS), Toksologio kaj sanaj aspektoj de melamino kaj cianurata acido: Raporto pri kunlabora fakula kunveno de MOS/FAO subtenata de Sano-Kanado, Otavo, Kanado, 1-4 decembro 2008 (2009).
Korma, SA, et al. Kompara studo pri lipida konsisto kaj kvalito de bebmanĝa pulvoro enhavanta novajn funkciajn strukturajn lipidojn kaj komerca bebmanĝa lakto. European Food Research and Technology 246, 2569–2586 (2020).
El-Waseef, M. kaj Hashem, H. Plibonigo de nutra valoro, kvalitaj atributoj kaj bretodaŭro de beblakto uzante palmoleon. Middle East Journal of Agricultural Research 6, 274–281 (2017).
Yin, W., et al. Produktado de monoklonaj antikorpoj kontraŭ melamino kaj evoluigo de nerekta konkurenciva ELISA metodo por la detekto de melamino en kruda lakto, seka lakto kaj besta furaĝo. Journal of Agricultural and Food Chemistry 58(14), 8152–8157 (2010).


Afiŝtempo: 11-a de aprilo 2025